LC – Tečna hromatografija

Portfolio inovativnih i pouzdanih instrumenata za tečnu hromatografiju (LC) kompanije Thermo Scientific™ obuhvata kompletan spektar sistema za tečnu hromatografiju visokih i ultra-visokih performansi (HPLC i UHPLC). Portfolio uključuje analitičke HPLC i UHPLC sisteme pogodne za jednostavna, ali i vrlo zahtjevna razdvajanja, zatim fleksibilne HPLC i UHPLC sisteme za specifične primjene kao što su 2D-LC i Dual LC, kao i nano-, kapilarne i mikroprotočne UHPLC sisteme za napredne analize u proteomici, metabolomici i analizi intaktnih proteina.

FAQ: Visokoefikasna tečna hromatografija (HPLC)

Šta je HPLC i za šta se koristi?

Visokoefikasna tečna hromatografija (HPLC) predstavlja zlatni standard za razdvajanje i analizu supstanci u tečnom stanju. Široko se koristi za kontrolu kvaliteta lijekova, analizu hrane, ispitivanje okoliša i brojne istraživačke primjene.

Koja je razlika između HPLC i UHPLC sistema?

UHPLC sistemi, poput Thermo Scientific™ Vanquish™ platforme, rade pod znatno višim pritiscima. To omogućava korištenje kolona sa manjim česticama, što rezultira bržim analizama, boljom rezolucijom i manjom potrošnjom rastvarača.

Kako odabrati odgovarajuću HPLC kolonu?

Izbor kolone zavisi od karakteristika analita. Za opće primjene najčešće se koriste C18 kolone, poput Thermo Scientific™ Accucore™ i Thermo Scientific™ Hypersil GOLD™, zahvaljujući njihovoj svestranosti i pouzdanosti u radu sa širokim spektrom jedinjenja.

Zašto je pritisak u HPLC sistemu previsok?

Povećan pritisak najčešće ukazuje na začepljenje sistema ili same kolone. Redovna zamjena filtera i korištenje kvalitetnih kapilarnih spojeva, poput Viper spojeva bez mrtvog volumena, pomažu u održavanju stabilnog rada sistema.

Šta su mrtvi volumeni i kako utiču na rezultate?

Mrtvi volumeni predstavljaju prostore u spojevima kroz koje se uzorak zadržava i širi. To može dovesti do širenja pikova i smanjenja kvaliteta razdvajanja. Thermo Scientific™ rješenja sa „zero-dead-volume“ tehnologijom eliminišu ovaj problem i osiguravaju maksimalnu oštrinu pikova.

Koliko često treba mijenjati potrošne dijelove?

Učestalost zamjene zavisi od intenziteta korištenja sistema i vrste rastvarača. Preventivno održavanje jednom godišnje ili nakon određenog broja radnih sati omogućava pouzdan rad sistema i sprječava curenja ili neočekivane kvarove.

Kako poboljšati osjetljivost detekcije?

Pored optimizacije metode, ključnu ulogu ima izbor detektora. Napredni detektori kao što su Variable Wavelength Detector (VWD), Diode Array Detector (DAD), Charged Aerosol Detector (CAD) ili sistemi masene spektrometrije (LC-MS) značajno povećavaju osjetljivost i snižavaju granice detekcije.

Zašto se pojavljuju mjehurići zraka u sistemu?

Prisustvo zraka u mobilnoj fazi može uzrokovati nestabilnost bazne linije. Moderni HPLC sistemi opremljeni su integrisanim degaserima koji uklanjaju rastvorene gasove prije nego što mobilna faza dospije do pumpe.

Šta je gradijentno eluiranje i kada se koristi?

Gradijentno eluiranje podrazumijeva promjenu sastava mobilne faze tokom analize. Koristi se kada uzorak sadrži komponente različitih hemijskih osobina, omogućavajući njihovo efikasno razdvajanje i eluiranje u prihvatljivom vremenskom periodu.

Kako Thermo Scientific™ Chromeleon™ softver olakšava rad?

Thermo Scientific™ Chromeleon™ CDS objedinjuje upravljanje instrumentima i obradu podataka u jedinstvenoj platformi. Softver omogućava usklađenost sa regulatornim zahtjevima (compliance), jednostavniju integraciju pikova, efikasnije upravljanje podacima i bržu izradu izvještaja.